Клеточная биология: Протопласты растений

Коротко о протопластах растений: выделение, культивирование, регенерация, слияние протопластовэто растительная клетка без клеточной стенки. Стенка удаляется с помощью целлюлозных и прототических ферментов. Очень важно, чтобы как можно больше клеток выжило в процессе ферментативного удаления клеточных стенок. Так называемое энергичность. Материал, используемый для выделения протопластов. Состав раствора, который используется для выделения протопластов, может варьироваться в зависимости от того, где мы собираем клетки, что это за растение и т.д. Как правило, такой раствор должен содержать ферменты, регулятор осмотического давления (чаще всего это сахар. растворы) и минеральные соли. Сразу после окончания инкубации в растворах, содержащих ферменты, суспензию клеток следует профильтровать в асептических условиях. Затем взвесь перемешивают в растворе,основным ингредиентом которого также является сахар - чаще всего сахароза. Протопласты плавают на поверхности, а мертвые клетки и фрагменты тканей попадают в супернатант или образуют осадок.

Затем протопласты помещают в жидкую или отвержденную агарозой среду, содержащую регуляторы роста в дополнение к стандартным ингредиентам. Затем происходит процесс регенерации клеточной стенки. Следующим шагом является индукция деления клеток. Они могут происходить уже через 2 дня после установления культуры. Клетки, которые уже окружены клеточной стенкой, не требуют повышенного осмотического давления. Поэтому состав среды меняется для восстановления тургора клеток.
Завершающий этап культивирования - возобновление растений. Чтобы это произошло, образовавшиеся агрегаты протопластов должны быть перенесены с предыдущей среды на новую, имеющую другой, более бедный состав. Чаще всего регенерация растений заканчивается минимум через 2 месяца от начала изоляции.

Слияние протопластов
Целью слияния протопластов, будь то растения или животных, является получение новых ядерных, цитоплазматических и ядерно-цитоплазматических комбинаций.
A. Химическое слияние протопластов В
этом методе используется полиэтиленгликоль, который в присутствии ионов Са стимулирует слияние. Используется полиэтиленгликоль массой до 8 кДа. Также применяется модификация этого метода с использованием ДМСО.
Б. Электросварные
протопласты располагаются вдоль электрического поля в результате протекания электрического тока с частотой 0,5-4 МГц и интенсивностью до 500 В / см. Затем короткий электрический импульс постоянного тока заставляет соседние протопласты сливаться вместе (электропорация мембран протопластов). При регистрации компания 1xbet возвращает новичкам сумму до 5000 рублей (100 евро, 100 долларов) после первого пополнения счета. Сумма эквивалента сумме и валюте внесения (не больше обозначенной). Для получения нужно: Зарегистрироваться на сайте 1xbet. Указать все требуемые персональные данные иметь промокод 1xbet его нужно ввести в специальную графу во время регистрации. xbet бонус на первый депозит начисляется ТОЛЬКО при внесении вами собственных средств на счет.1xbet бонусный счет как пользоваться. Стоит оговориться, что схему отыгрыша бонуса вы выбираете самостоятельно.